Метод ПЦР в гинекологии. ПЦР-диагностика внутриутробных инфекций

Подробная инструкция о том, как позаботиться о себе и своих близких при первых тревожных признаках

Преимущества метода ПЦР диагностики как метода диагностики инфекционных заболеваний

Прямое определение наличия возбудителей

Многие традиционные методы диагностики, например иммуноферментный анализ, выявляют белки-маркеры, являющиеся продуктами жизнедеятельности инфекционных агентов, что дает лишь опосредованное свидетельство наличия инфекции. Выявление специфического участка ДНК возбудителя методом ПЦР дает прямое указание на присутствие возбудителя инфекции.

Высокая специфичность

Высокая специфичность метода ПЦР обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется уникальный, характерный только для данного возбудителя фрагмент ДНК. Специфичность задается нуклеотидной последовательностью праймеров, что исключает возможность получения ложных результатов, в отличие от иммунологических методов анализа, где нередки ошибки в связи с перекрестно-реагирующими антигенами.

Высокая чувствительность

Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР анализ обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Чувствительность ПЦР анализа составляет 10-100 клеток в пробе (чувствительность иммунологических и микроскопических тестов — 103-105 клеток).

Универсальность процедуры выявления различных возбудителей

Материалом для исследования методом ПЦР служит ДНК возбудителя. Метод основан на выявлении фрагмента ДНК или РНК, являющегося специфичным для конкретного организма. Сходство химического состава всех нуклеиновых кислот позволяет применять унифицированные методы проведения лабораторных исследований. Это дает возможность диагностировать несколько возбудителей из одной биопробы.

Высокая скорость получения результата анализа

Для проведения ПЦР анализа не требуется выделение и выращивание культуры возбудителя, что занимает большое количество времени. Унифицированный метод обработки биоматериала и детекции продуктов реакции и автоматизация процесса амплификации дают возможность провести полный анализ за 4-5 часов.

Возможность диагностики не только острых, но и латентных инфекций

Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и персистирующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях. Применение ПЦР диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов.

Что такое ПЦР

Полимеазная цепная реакция является экспериментальным методом молекулярной биологии, результативно применяющимся сегодня в медицине.

Суть исследования заключается в том, что при помощи особенных ферментов многократно умножаются фрагменты ДНК возбудителей заболевания во взятых пробах биоматериала. Это позволяет выявить вид вируса, а также его количество. Исследование проводят как для диагностики, так и для контроля за процессом лечения.

В науке полимеразная цепная реакция позволяет клонировать и выделять новые гены, исследовать мутации и т.п.

Метод ПЦР-диагностики имеет ряд преимуществ:

  • Точность (90-95%).
  • Оперативность (12-24 часа).
  • Ранняя диагностика заболеваний.
  • Чувствительность.
  • Большой выбор материалов для проведения анализа.
  • Универсальность.

Недостатком можно считать высокую стоимость анализа.

За изобретение данного метода диагностики в конце прошлого века американский ученый Кэрри Мюллис был удостоен Нобелевской премии.

Читайте также:  Хламидиоз (хламидийная инфекция)

Какие заболевания диагностируют методом ПЦР

Полимеразная цепная реакция позволяет с высокой точностью определить следующие инфекции:

  • Гепатит В и С.
  • Уреаплазмоз.
  • Хламидиоз.
  • Молочницу.
  • Микоплазмоз.
  • Гарднереллез.
  • Сальмонеллез.
  • Папилломавирус.
  • Герпес.
  • Трихомониаз.
  • Дифтерия.
  • Онковирусы.
  • COVID-19.

Также этим методом производится тест на отцовство.

Врачи рекомендуют проводить процедуру в случае появления выделений неестественного характера, зуда или жжения в области половых органов, а также после случайного незащищенного полового контакта. После выявления вида возбудителя нередко назначают дополнительные анализы для определения оптимального курса терапии.

Расшифровка

Значения могут носить отрицательный либо положительный характер. В первом случае можно говорить о том, что никаких инфекций и патологий не выявлено, во втором, они обнаружены и человек заражен.

Часто позитивный результат наблюдается у носителей инфекций, но при этом люди себя абсолютно нормально чувствуют, ни на что не жалуются. Нужно отметить, что это ранняя стадия болезни, которая пока себя не проявила, нужна консультация доктора. Когда недуг был обнаружен, нужно обязательно предпринять терапевтические меры.

Пцр диагностика инфекций выступает на сегодняшний день самым точным исследованием и позволяет безошибочно определить наличие вредителя.

Что известно о тестах

Сдавать тест на коронавирус при первых же симптомах ОРВИ не нужно. Тестирование имеет смысл, когда его рекомендует лечащий врач. В целом тот факт, сдали вы тест или нет, мало что меняет. Лекарства от коронавируса все еще не изобрели, поэтому лечиться дома придется обильным питьем и долгим сном.

Отрицательный результат ПЦР-теста не отменяет самоизоляцию. Он не гарантирует, что человек здоров и безопасен для других людей. По оценкам, количество ложноотрицательных результатов может составить от 5 до 40%. Зафиксирован случай, когда мужчина четыре раза получал отрицательные результаты, и только пятый тест показал, что он болен. Чтобы не заразить окружающих, эксперты советуют всем, у кого есть симптомы COVID-19, по умолчанию считать себя инфицированными и соблюдать карантин. Если самоизолироваться не получится, хотя бы носите маску, дезинфицируйте руки, чихайте в локоть и по возможности избегайте контакта с людьми.

Экспресс-тест на антиген может определить, болен ли человек, но не очень точно. Как и ПЦР, он делается по образцу из носа или горла, но ищет не генетический материал вируса, а только определенные белки вируса — его антигены. Специфичность теста на антиген высокая, и положительному результату можно верить. Однако чувствительность у него ниже, чем у ПЦР-теста, поэтому более вероятны ложноотрицательные результаты. Если есть симптомы, но экспресс-тест на антиген дал отрицательный результат, FDA рекомендует сделать ПЦР.

Антительный тест может определить, было ли у человека недавнее (антитела IgM) или прошлое (антитела IgG) заражение SARS-CoV-2. Их не используют для диагностики COVID-19. Они нужны эпидемиологам, чтобы понять, как много людей уже переболели ковидом, в том числе бессимптомно, а для частного лица не имеют большой ценности. Во-первых, тест может дать ложноположительный результат, приняв за антитела к новому коронавирусу антитела к другим сезонным коронавирусам, что для отдельного человека сводит прогностическую ценность к подбрасыванию монетки. Во-вторых, наличие антител не означает иммунитет: как долго они могут сохраняться в крови и защищают ли от вируса — эти вопросы все еще открыты.

Читайте также:  Причина и лечение задержки месячных кроме беременности

Образцы для исследований

Материалом для ПЦР-анализа могут быть практически любые биологические жидкости человека. Чужеродные ДНК болезнетворных микроорганизмов способны проникать в любую среду. Чаще всего в качестве образца для исследований применяется кровь и ее отдельные компоненты (плазма или сыворотка). В жидкой ткани могут присутствовать РНК вирусного гепатита, простого герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ.

Широкие показания к исследованию имеют биологические жидкости. К ним относятся:

  • сок простаты;
  • сперма;
  • вагинальный секрет;
  • спинномозговая (ликвор) ;
  • амниотическая;
  • Образцы для исследований
  • бронхоальвеолярный лаваж;
  • суставная жидкость;
  • слюна.
  • Для диагностики венерических заболеваний типа гонореи, хламидиоза, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомониаза, гарднереллеза, герпетических форм и др., у пациентов берут эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. У мужчин берут мазок ПЦР из уретры, а у женщин – из влагалища или шейки матки.

    Отдельная категория – биоптаты. Чаще всего биоптаты исследуют с целью определения природы новообразования, подтверждения его злокачественности. Биоптаты желудка и двенадцатиперстной кишки требуются для выявления бактерии Хеликобактер пилори и ее количественной нагрузки.

    Моча как биоматериал используется при инфекционных поражениях мочевыделительной системы. У мужчин мазок ПЦР нередко заменяют исследованием мочи, поскольку уретра у представителей сильного пола является универсальным элементом мочеполового тракта.

    Для диагностики туберкулеза и обструктивных болезней легких исследуется мокрота. Материал могут собирать в стерильный флакон (15-20 мл) или брать мазок из зева. ПЦР-анализ также используют для выявления осложненных форм микоплазмоза и хламидиоза – при отсутствии лечения и других неблагоприятных факторов данные виды инфекции способны поражать респираторную систему человека.

    В каких сферах используется метод

    Исследование ПЦР может применяться в клинической практике для идентификации различных заболеваний. Широко используется в гинекологии, урологии, гастроэнтерологии, онкологии и др.  Кроме того, он эффективно применяется в криминалистике для установления личности и при установлении отцовства.

    Данный тип исследования используется на этапе планирования и во время беременности. Анализ на TORCH-инфекции проводится для того, чтобы выявить присутствие инфекции в организме женщины. Заболевания, вызванные одной из инфекций, могут протекать в легкой форме для женщины, но вызывать серьёзные врождённые дефекты плода, вплоть до его гибели.

    Также метод ПЦР диагностики помогает определить генетическую предрасположенность человека к развитию определённых заболеваний в будущем.

    Мазок на бактериологический посев у женщин

    Анализ представляет собой посев выделений у женщин на питательные среды.

    После образования колоний микроорганизмов лаборант может определить разновидность патогена.

    Результаты исследования готовятся несколько дней, что представляет некоторые неудобства для врача и пациентки.

    Какие инфекции у женщин можно выявить, сделав анализ на бакпосев?

    Бактериологический посев проводится только для выявления бактериальной микрофлоры.

    Вероятность ошибки практически отсутствует.

    Определить вирусы или грибки данным способом нельзя.

    Что такое ПЦР?

    Аббревиатура ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Это возможность участка ДНК пропорционально приумножаться при необходимых условиях. Изобретена ПЦР-диагностика инфекций еще в 1980-х годах. Работали над открытием европейские, американские и советские ученые, поэтому определить первоизобретателя инновационного диагностического метода не представляется возможным. Кроме того, начиная с 1983 года, когда был официально зарегистрирован такой метод исследования инфекционных заболеваний, как ПЦР, продолжается работа по усовершенствованию данного способа. На сегодняшний день такой метод диагностики применяют практически в каждой медицинской лаборатории, имеющей современное необходимое оборудование.

    ПЦР диагностика инфекций

    Мазок ПЦР у женщин, что это такое, для чего берется и по каким правилам? Данное исследование позволяет очень точно выявить возбудителей различных инфекций и виновников воспалительных процессов (вульвовагинитов). Берется ПЦР анализ у живущих половой жизнью и никогда не обследовавшихся, планирующих беременность, имевших незащищенные половые контакты, мазок сдают и женщины, и мужчины. Полимеразная цепная реакция, именно так расшифровывается ПЦР, дает возможность в небольшом количестве взятого на анализ материала найти генетическую информацию инфекционного возбудителя. Самым распространенным является мазок методом ПЦР на ИППП (хламидии, уреаплазмы, микоплазмы), кстати, эти же инфекции относятся к разряду «скрытых», не дающих явной симптоматики и не выявляющихся при обычных, рядовых исследованиях. Часто проводится диагностика герпетических инфекций, а также различных типов папилломавирусной инфекции. При этом особое внимание уделяется тем типам, которые вызывают рак шейки матки, то есть онкогенным.

    Мазок ПЦР на хламидии и другие инфекции берут у будущих мам, если те во время планирования ребенка его не сдавали. Данное исследование обязательно необходимо, так как скрытые инфекции, передающиеся половым путем, могут много лет «сидеть» в организме, никак себя не проявляя, но очень навредят будущему ребенку, могут привести к выкидышу, преждевременным родам, внутриутробной инфекции, а вследствие этого гибели плода. Конечно, лучше проводить лечение на этапе планирования ребенка, но если ПЦР диагностика инфекций их обнаружила уже после зачатия — не беда, есть современные безопасные препараты, которые можно принимать будущим мамам.

    Многие женщины боятся сдавать анализы, наслушавшись и начитавшись о том, что любые манипуляции «там» врача могут спровоцировать выкидыш. А тем более нельзя сдавать мазок ПЦР при беременности, так как материал берется из шейки матки, а не с ее поверхности. Но это не страшно. Длина шейки матки немаленькая. Инструмент не попадет в матку, никак не затронет ребенка. И шейку расширять для взятия биоматериала не нужно. Мазок из цервикального канала безопасен для матери и ребенка и безболезненен.

    ПЦР диагностика инфекций

    Делается данное исследование не только с целью обнаружения инфекций, передающихся половым путем, но и возбудителей бактериального вагиноза и кандидоза — гарднерелл и грибов рода Кандида. Так что, расшифровка мазка на ПЦР диагностику бывает полезна и в таких «банальных» случаях.

    Чтобы получить точный результат анализа, нужно соблюдать несколько простых правил перед его сдачей. Подготовка к мазку на ПЦР очень проста. 1. Нельзя мочиться за 3 часа до сдачи анализа. 2. Исследование проводится вне приема антибиотиков и антибактериальных средств. 3. Лучше сдавать мазок в середине цикла, но не перед самым началом менструации или сразу после завершения. 4. За 2-3 суток до исследования не использовать местных средств контрацепции и вагинальных препаратов. 5. В течение нескольких часов до сдачи мазка нельзя подмываться и спринцеваться. 6. Половую жизнь нужно прекратить минимум за 1,5 суток до взятия материала. 7. Сдачу мазка следует немного отложить, если накануне были взяты кольпоскопические пробы для выявления заболеваний шейки матки.

    Среди современных методов диагностики одним из наиболее точных и информативных считается мазок на ПЦР. Преимуществом метода полимеразной цепной реакции является возможность использования любого биологического материала. Чаще всего соскоб для лабораторного исследования берут из половых органов мужчин и женщин с целью обнаружения и профилактики инфекций, передающихся половым путем.